Extrakt z listov Engelhardia Roxburghiana

Dihydroquercetin extrakt z listov Engelhardia Roxburghianaje dihydroflavonolová zlúčenina nachádzajúca sa v mnohých rastlinách. Okrem syntetického dihydrokvercetínu na trhu je hlavným prírodným zdrojom smrekovec. Naša spoločnosť výskumom na listoch Astragalus membranaceus zistila, že prírodné listy Astragalus membranaceus obsahujú aj dihydrokvercetín. Keďže zdroje smrekovca sú čoraz vzácnejšie, objav našej spoločnosti môže výrazne znížiť výrobné náklady dihydrokvercetínu a poskytnúť cenovo najefektívnejšie dihydrokvercetínové produkty na trhu.

Ako najväčší výrobca dihydrokvercetínu v Číne má KINTAI dva hlavné spôsoby prípravy dihydrokvercetínu: biosyntézu a extrakciu. Dihydrokvercetín, ktorý v súčasnosti vyrábame, sa získava hlavne zo smrekovca a časť z listov vlčieho bôbu. Biosyntéza sa chystá vstúpiť do pilotného výrobného testu a po dokončení vám prinesie vysokokvalitné a lacné dihydrokvercetínové produkty. V nasledujúcom texte predstavíme najmä súčasný proces extrakcie našej spoločnosti pomocou listov vlčieho bôbu a metódu syntézy biosyntézy. Ak máte záujem o bližšie informácie, kontaktujte nás pre odbornejšie odpovede.

COA of DHQ / Taxifolin

Správa o analýze kvapalinovou chromatografiou

Náš výskumný tím nedávno urobil dôležitý prelom v štúdiu mikrobiálnej syntézy dihydroquercetínu

Dihydroquercetin je dôležitá flavonoidová zlúčenina, ktorá je široko používaná v potravinárstve, medicíne a poľnohospodárstve kvôli jej antioxidačným, protizápalovým, protinádorovým a iným fyziologickým aktivitám. Tradičné metódy ťažby rastlín sú však obmedzené ročnými obdobiami, geografickými podmienkami a zásobou surovín, čo má za následok vysoké výrobné náklady a nestabilnú produkciu. Atraktívnou možnosťou sa preto stáva použitie mikroorganizmov na heterológnu syntézu dihydrokvercetínu.

Mikrobiálna syntéza môže nielen zabrániť týmto prekážkam pri extrakcii rastlín, ale má aj výhody krátkeho výrobného cyklu, nízkych environmentálnych požiadaviek a ľahkej kontroly kvality. Avšak v dôsledku obmedzení faktorov, ako je metabolická regulácia, zostáva hlavnou výzvou, ako efektívne dosiahnuť syntézu dihydrokvercetínu v mikroorganizmoch. Skríningom kľúčových enzýmov, promótorovým inžinierstvom, integráciou viacerých kópií a metabolickým preprogramovaním sme výrazne zlepšili produkciu dihydrokvercetínu a poskytli efektívny spôsob jeho priemyselnej výroby.

Skríning a optimalizácia kľúčových enzýmov F3'H a F3H

Proces syntézy dihydrokvercetínu sa opiera o katalýzu dvoch kľúčových enzýmov, F3'H a F3H. F3'H katalyzuje hydroxyláciu (2S)-naringenínu v polohe C-3' flavonoidového skeletu za vzniku (2S)-eriodictyolu; F3H premieňa (2S)-naringenín na dihydrokaempferol. Na zlepšenie produkcie dihydrokvercetínu sme skrínovali tri F3'H a päť F3H z rôznych rastlín. Po experimentoch sa zistilo, že najlepšie katalytické účinky majú SmF3'H a CsF3H, produkujúci (2S)-eriodictyol a dihydrokaempferol s výťažkami 254,1 mg/l a 173,4 mg/l. Preto sme vybrali tieto dva enzýmy na následnú optimalizáciu syntézy.

Optimalizácia promotérskych projektov

Aby sa ďalej zlepšila expresia SmF3'H a CsF3H, zaviedli sme promótorové inžinierstvo a optimalizovali sme hladiny expresie týchto kľúčových enzýmov. Skríningom promótorov rôznej sily sa zistilo, že keď boli SmF3'H a SmCPR exprimované pod kontrolou promótorov PGAL1 a PGAL10, titer (2S)-eriodictyolu bol najvyšší a dosiahol 382,1 mg/l. Podobne sme významne zvýšili produkciu dihydrokaempferolu reguláciou expresie CsF3H a použitím promótorov rôznej sily, ako sú PTDH1, PGAL7 a PSSA1. Táto optimalizácia ukazuje, že zvýšením úrovne expresie kľúčových enzýmov možno efektívne zlepšiť účinnosť syntézy cieľových metabolitov.

 Integrácia viacerých kópií zlepšuje výstup

Aby sme ďalej zlepšili produkciu dihydrokvercetínu, prijali sme technológiu integrácie viacerých kópií génov. Integráciou génovej kópie dráhy syntézy dihydrokvercetínu do miesta s viacerými kópiami Ty2 Saccharomyces cerevisiae sme úspešne získali vysoko produkčný kmeň FQ26ty, ktorého titer dihydrokvercetínu dosiahol 71,4 mg/l. Kvantitatívna génová analýza ukázala, že počet kópií génov SmF3H, SmF3'H a SmCPR sa pohyboval od 2,87 do 3,44, čo naznačuje, že integrácia viacerých kópií génu významne zvýšila produkciu dihydrokvercetínu. Okrem toho sme ďalšou integráciou viacerých kópií génov syntéznej dráhy skonštruovali kmeň FQE-D a úspešne zvýšili produkciu dihydrokvercetínu na 74,5 mg/l. Tento výsledok dokazuje, že zvýšenie počtu kópií kľúčových génov syntetickej dráhy je účinnou stratégiou na zvýšenie výťažku cieľových produktov.

Metabolické preprogramovanie a optimalizácia metabolizmu uhlíka

Okrem optimalizácie kľúčových enzýmov a génovej integrácie sme tiež metabolicky preprogramovali systém metabolizmu uhlíka Saccharomyces cerevisiae, aby sme ďalej zvýšili produkciu dihydroquercetínu. Najprv sme zaviedli gény súvisiace s dráhou PAL, vrátane AtPAL2, AtC4H, AtATR2 a ScCYB5, a výsledný kmeň FQ27 dosiahol produkciu dihydrokvercetínu 87,8 mg/l. Následne sme výťažok ďalej zvýšili na 103,9 mg/l nadmernou expresiou kľúčových génov ARO1/2/3 šikimátovej dráhy a génu EcAROL odvodeného z E. coli. Okrem toho sme zaviedli aj heterológnu fosfoketolázovú dráhu, aby sme pevne spojili centrálny metabolizmus uhlíka so syntézou erytrózo-4-fosfátu, a potom sme získali kmeň FQ29 s produkciou dihydrokvercetínu 107,5 mg/l.

Optimalizácia dodávky NADPH a alfa-ketoglutarátu

F3'H potrebuje spotrebovať NADPH počas katalytického procesu, zatiaľ čo F3H vyžaduje -ketoglutarát ako ko-substrát. Preto, aby sme zvýšili prísun týchto dvoch kľúčových látok, nadmerne sme exprimovali gény ako TYR1 a ZWF1, aby sme zvýšili prísun NADPH. Experimenty ukazujú, že koexpresia TYR1 a mutantného BDH1* zvyšuje produkciu dihydrokvercetínu o 20,2 %, pričom dosahuje 175,8 mg/l. Okrem toho nadmerná expresia ARO8 ďalej podporovala produkciu -ketoglutarátu, čo viedlo k produkcii dihydrokvercetínu dosahujúcej 206 mg/l. Nakoniec sme nadmernou expresiou IDH1 získali vysoko výťažný kmeň FQ38 s výťažkom 235,1 mg/l.

Prieskum priemyselnej výroby

Na základe optimalizácie v laboratórnom meradle sme ďalej uskutočňovali fed-batch fermentačné experimenty v 5 1 bioreaktore. Pridaním 5 g/l CaCO3 počas fermentačného procesu sme úspešne zvýšili titer dihydrokvercetínu na 873,1 mg/l v priebehu 114 hodín, čím sme vytvorili nový výrobný rekord.

V súhrne sme výrazne zlepšili účinnosť mikrobiálnej syntézy dihydrokvercetínu prostredníctvom systematického metabolického inžinierstva a optimalizácie fermentačného procesu. Tento výskum poskytuje nielen technický základ pre priemyselnú výrobu dihydrokvercetínu, ale poskytuje aj referenciu pre mikrobiálnu syntézu iných rastlinných sekundárnych metabolitov.

Doplnky stravy
Funkčné potraviny
Kozmetika

V ére, keď je zdravie a wellness stredobodom záujmu, je DHQ lídrom v snahe o dlhovekosť, vitalitu a celkovú pohodu. Ako najväčší dodávateľ výťažkov z smrekovca DHQ v Číne je Kintai vaším preferovaným partnerom pre vysokokvalitné, prírodné riešenia na podporu vašich cieľov v oblasti zdravia a wellness.Ak chcete kúpiť vysoko kvalitnéExtrakt z listov Engelhardia Roxburghiana, neváhajte nás kontaktovať na adresesales@kintaibio.comalebo spätnú väzbu na nasledujúcej strane.

Populárne Tagy: extrakt z listov engelhardia roxburghiana, Čína výrobcovia, dodávatelia, továreň na extrakt z listov engelhardia roxburghiana